对比多肽的固相合成与常规液合成工艺的主要差别有哪些(常规多肽的固相合成方法)
大家好,苏苏来为大家解答以上问题。对比多肽的固相合成与常规液合成工艺的主要差别有哪些,常规多肽的固相合成方法很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、树脂膨胀
2、称取取代度为1.0mmol/g的0.6 gctc树脂,放入反应管中,加入DCM(约15ml/g),摇匀30分钟。如果选用其他树脂,通常会预先将第一个氨基酸与树脂连接,如Fmoc-Leu-WangResin,溶胀后直接进行第三次脱保护操作。
3、第二,缩合第一个氨基酸
4、砂芯滤除溶剂,加入3倍摩尔过量的Fmoc-Leu-OH,加入少量DMF溶解,然后加入6倍摩尔量的DIPEA,最后加入2.85倍摩尔量的缩合试剂HBTU,吹氮0.5h,用DMF洗涤3-4次,除去少量树脂(约20个树脂),进行茚三酮检测。它是无色的。
5、第三,去保护
6、加入15毫升20%哌啶/DMF溶液(15毫升/克)5分钟,取出后再加入15毫升20%哌啶/DMF溶液(15毫升/克)15分钟。用DMF洗5次,去除少量树脂(约20个树脂)用于茚三酮检测。它是蓝色的(或其他颜色的)。
7、4.以此类推重复第二步和第三步,最后用甲醇洗树脂3次,沥干。最后得到流沙形态的树脂肽,如H2N-Gly-Arg(PBF)-His(TRT)-ile-leu-CTC树脂。
8、第五,切割
9、具体可参考多肽切割,已经详细介绍过了。
10、不及物动词补充:
11、一般用茚三酮检测,加热温度110左右,加热时间3min。解决方法有很多种,实验者可以多尝试。
本文到此结束,希望对大家有所帮助。
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