今日离子交换层析洗脱顺序(离子交换层析)

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今日离子交换层析洗脱顺序(离子交换层析)

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1、如果用离子交换层析来分离物质,以蛋白质为例。在离子交换层析,基质由带电树脂或纤维素组成。带正电荷的阴离子交换树脂;而带负电荷的被称为阳离子树脂。离子交换层析也可用于蛋白质的分离和纯化。

2、因为蛋白质也有等电点,蛋白质在不同的pH条件下,其带电状态也不同。阴离子交换基质结合带负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质留在柱上,然后通过增加洗脱液中盐浓度等措施将吸附在柱上的蛋白质洗脱下来。具有弱结合的蛋白质首先被洗脱。

3、相反,阳离子交换基质结合带正电荷的蛋白质,通过逐渐增加洗脱液中的盐浓度或增加洗脱液的pH值,可以将结合的蛋白质洗脱下来。

4、扩展信息:

5、对于离子交换纤维素,少量不易沉淀的破碎颗粒要用流水冲洗掉,以保证良好的均一性,但对于溶胀的产品,这一步不需要。

6、溶胀的交换剂在使用前应先用稀酸或稀碱处理,使其成为含H或OH-的交换剂型。阴离子交换剂通常经过“碱-酸-碱”处理,最终变成-OH-型或盐型交换剂;阳离子交换剂经过“酸-碱-酸”处理,最后转化为-H型交换剂。

7、梯度不要升得太快,只要使移动区在柱端附近达到解吸状态即可。目标的过早解吸将导致区域扩散;但靶的后期解吸会使峰形过宽。

8、来源:搜狗百科——离子交换层析

本文到此结束,希望对大家有所帮助。

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